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BUNSEN本生為您詳解、細(xì)胞培養(yǎng)基知識大全

更新時間:2023-08-16    點擊次數(shù):1980

  BUNSEN本生為您詳解、細(xì)胞培養(yǎng)基知識大全


  一、細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展歷史

  細(xì)胞體外培養(yǎng)初期使用的培養(yǎng)基,都是天然培養(yǎng)基,也就是組織提取物或者體液,如血漿、血清、淋巴液、胚胎浸出液等,直到20世紀(jì)50年代Parke、Eagle等人,設(shè)計出化學(xué)成分明確的合成培養(yǎng)基:MEM培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基,這兩種培養(yǎng)基直到現(xiàn)在還被人們廣泛使用。在此基礎(chǔ)上,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn),在合成培養(yǎng)基中添加血清,可以使細(xì)胞維持更高的活細(xì)胞密度和更長的培養(yǎng)時間。隨著血清成分的不斷明確,科學(xué)家們逐步開始研發(fā)無血清培養(yǎng)基,減少血清對細(xì)胞培養(yǎng)的影響。

  二、細(xì)胞培養(yǎng)基組成成分及功能

  1、氨基酸

  氨基酸是培養(yǎng)基中主要的氮源物質(zhì),也是重要的能源物質(zhì)。

  2、維生素

  一般培養(yǎng)基中含有的維生素有:①脂溶性維生素:如A、D、E、K等;②水溶性維生素:如B、C、葉酸、煙酰胺等。培養(yǎng)基中添加維生素可以適合更多細(xì)胞系的生長。

  3、無機鹽

  無機鹽是維持培養(yǎng)基滲透壓平衡的主要物質(zhì),它還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能,無機鹽主要包括:Ca2+、Mg2+、Cl-、Na+、K+等。



  4、碳水化合物

  細(xì)胞培養(yǎng)基中的碳水化合物通常被用作細(xì)胞的能量來源,常用的有葡萄糖、丙酮酸鈉等。

  5、脂類

  脂類物質(zhì)作為有機能量的來源,可以滿足細(xì)胞新陳代謝的需求,也可以支持細(xì)胞生長和存活,培養(yǎng)基中的脂類物質(zhì)主要有:膽固醇、乙醇胺、亞油酸等。

  6、激素

  激素類物質(zhì)主要包含:胰島素、生長激素、腎上腺素等,可以促進細(xì)胞生長、提高細(xì)胞增殖能力,

  7、微量元素

  細(xì)胞培養(yǎng)基中微量元素主要有:銅、錳、鋅、硒等,這些微量元素對細(xì)胞無蛋白長期穩(wěn)定培養(yǎng)具有重要作用。

  8、特殊添加物

  蛋白水解物、酵母水解物等這些特殊添加物可以起到抗氧化劑、抗剪切劑、刺激抗體表達等作用。

  9、緩沖體系

  通常細(xì)胞培養(yǎng)基中會添加HEPES、磷酸鹽等緩沖物質(zhì),可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH、滲透壓等。



  三、培養(yǎng)基種類

  1、BME細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于各種傳代細(xì)胞系。

  2、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基:適合多種細(xì)胞單層生長。

  3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基:根據(jù)葡萄糖含量可以分為低糖和高糖2種類型,低糖適用于培養(yǎng)貼壁依賴性細(xì)胞,高糖適用于高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。

  4、DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于原代細(xì)胞培養(yǎng)及難培養(yǎng)細(xì)胞。

  5、M199細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞及能轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。

  6、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。

  7、RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于懸浮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等細(xì)胞培養(yǎng)。

  8、HamF10細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于克隆化培養(yǎng)。

  9、McCoy5A細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于原代細(xì)胞培養(yǎng)、淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)的細(xì)胞。

  10、L15細(xì)胞培養(yǎng)基:適用于快速增殖的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。

  四、培養(yǎng)基保存方法

  1、液體培養(yǎng)基

  液體培養(yǎng)基應(yīng)于2-8℃冰箱保存,實驗前放入37℃預(yù)熱。

  2、干粉培養(yǎng)基

  2-8℃冰箱避光保存。

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