知識分享：超濾離心管常見問題

　　(實驗操作)

　　1. 超濾管的膜會因為離心時間過長而變干么?

　　不會，因為離心管有死體積設(shè)計，總會有溶液殘留在濾管中。

　　2. 超濾管可以用酒精消毒滅菌么?

　　本生離心管的裝置與70%乙醇是兼容的，但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測試，所以無法提供更進一步的參考信息。

　　3. 超濾裝置是否可以用于高壓滅菌?

　　不可以，BUNSEN本生離心管都是采用熱封設(shè)計，不可以用高壓高溫滅菌。

　　4. Millipore是否提供無熱源的超濾裝置?

　　Millipore提供的超濾裝置均非無熱源的，即使是無菌裝置也可能包含熱源。

　　5. 超濾管是否不含RNA酶?

　　不保證超濾管不包含RNA酶，建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時，以滅活RNA酶。殘留的DEPC可以用超純水洗滌除去。

　　6. 說明書中推薦在室溫下進行離心，考慮到蛋白的穩(wěn)定性，是否可以在4℃進行離心?

　　可以，但是低溫會增加蛋白樣品的粘性，導致流速減慢，建議可將離心時間延長到原來的 1.5倍。

　　7. 如何對超濾管進行去除內(nèi)毒素的處理?

　　超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)毒素處理的，同時由于內(nèi)毒素通常以多聚體的形式存在，大小在10-1000KD之間不等，在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用 0.5M NaOH預(yù)清洗，隨后用Milli-Q水/緩沖液buffer清洗的步驟去除大部分內(nèi)毒素。

　　8. 處理后樣品怎樣收集?

　　兩種方式：移液槍轉(zhuǎn)移和反轉(zhuǎn)離心

　　(1) 對于15 mL和4 mL的超濾管，可以直接通過移液槍收集處理后樣品

　　(2) 對于0.5 mL的超濾管，可以通過反轉(zhuǎn)離心的方式收集處理后樣品：將有濃縮樣品的超濾管(內(nèi)管)倒置于新的離心管中后，低速離心(1,000 g)后將樣品重新離心到新離心管中。

　　備注：以上信息僅供參考，具體信息說明及操作以廠家說明書為準。

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